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科研抗體定制服務(wù)

科研抗體定制

多克隆抗體定制 艾令達(dá)生物擁有專業(yè)的抗體制備人員、先進(jìn)的抗體制備生產(chǎn)儀器、引進(jìn)先進(jìn)的制備技術(shù),根據(jù)您的需求專業(yè)打造制備方案。
單克隆抗體定制



服務(wù)內(nèi)容

科研院校需向我單位提供詳細(xì)的抗體資料,并支付一筆經(jīng)費(fèi);我司將在4-6個(gè)月完成定制服務(wù)。

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服務(wù)介紹

多抗制備服務(wù)

大多數(shù)天然抗原物質(zhì)(如細(xì)菌或其分泌的外毒素以及各種組織成分等)往往具有多種不同的抗原決定簇,而每一決定簇都可刺激機(jī)體產(chǎn)生一種特異性抗體。

多克隆抗體是多個(gè)抗原決定簇刺激機(jī)體后,由多個(gè)免疫淋巴細(xì)胞分泌的多種抗體的混合物。


由于這種抗體是不均一的,無論是對抗體分子結(jié)構(gòu)與功能的研究或是臨床應(yīng)用都受到很大限制,因此稱為第一代抗體

單抗制備服務(wù)

在機(jī)體淋巴組織內(nèi)可存在千百種抗體形成細(xì)胞(即B細(xì)胞),每種抗體形成細(xì)胞只識(shí)別其相應(yīng)的抗原決定簇,當(dāng)受抗原刺激后可增殖分化為一種細(xì)胞群,這種由單一細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群體可稱為細(xì)胞克隆(clone)。

同一克隆的B細(xì)胞可合成和分泌在理化性質(zhì)、分子結(jié)構(gòu)、遺傳標(biāo)記以及生物學(xué)特性等方面都是完全相同的均一性抗體,亦可稱之為單克隆抗體。單克隆抗體為只針對某一特定的抗原決定簇,純度高的抗體,因此稱為第二代抗體。

1、優(yōu)點(diǎn)
(1)制備時(shí)不需純化抗原就可得到純抗體;   (2)有很高的效價(jià)
(3)有高度的單一性、均一性;          (4)產(chǎn)量高,且可連續(xù)生產(chǎn)

2、單克隆抗體制備基本原理

體內(nèi)免疫法很難獲得單克隆抗體,如能將所需要的抗體形成細(xì)胞選出,并能在體外進(jìn)行培養(yǎng),就可以獲得已知特異的單克隆抗體。

雜交瘤細(xì)胞:既具有骨髓瘤細(xì)胞能大量無限生長繁殖的特性,又具有抗體形成細(xì)胞合成和分泌抗體的能力。這種抗體是由識(shí)別一種抗原決定簇的細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的均一性抗體,故稱之為單克隆抗體。
應(yīng)用雜交瘤技術(shù)可獲得幾乎所有抗原的單克隆抗體,只要這種抗原能引起小鼠的抗體應(yīng)答。
(1)DNA合成
 ① 主要途徑:參考生物化學(xué),可被氨基喋呤(A)所阻斷
 ② 旁路途徑:利用次黃嘌呤(H)和胸腺嘧啶核苷(T)合成DNA;
        所需要的酶為次黃嘌呤-鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT)、胸腺嘧啶核苷激酶(TK)。
(2)骨髓瘤細(xì)胞:來源于BABC/ c小鼠的骨髓瘤細(xì)胞系;沒有合成抗體的能力;體外具有無限生長繁殖的能力;喪失合成HGPRT和TK的能力;只能通過主要途徑合成DNA;在含有次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A) 、胸腺嘧啶核苷(T)的HAT培養(yǎng)基中不能生長。
(3)免疫淋巴細(xì)胞:通常來源于BALB/c小鼠的脾淋巴細(xì)胞;具有合成抗體的能力;具有合成HGPRT和TK的能力;能通過主要途徑和旁路途徑合成DNA;HAT培養(yǎng)基中能生長,但短壽,只能存活幾天,體外不具有無限生長繁殖的能力
(4)融合劑:Kohler和Milstein最早仙臺(tái)病毒;后來發(fā)現(xiàn)聚乙二醇(PEG)的融合效果更好,且避免了病毒的污染問題。
(5)雜交瘤細(xì)胞:具有合成抗體的能力(從免疫淋巴細(xì)胞獲得);具有合成HGPRT和TK的能力(從免疫淋巴細(xì)胞獲得);能通過主要途徑和旁路途徑合成DNA;HAT培養(yǎng)基中能生長;體外具有無限生長繁殖的能力(從骨髓瘤細(xì)胞獲得)。
(6)飼養(yǎng)細(xì)胞:單個(gè)或少數(shù)細(xì)胞在體外培養(yǎng)很難成活,必需加入其他細(xì)胞以增加細(xì)胞密度,維持其代謝,使之成活繁殖;被加入的這種細(xì)胞稱為“飼養(yǎng)細(xì)胞”。最常用的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞。

3、單克隆抗體制備過程:




制備抗原 → 免疫動(dòng)物 → 免疫脾細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的制備 → 細(xì)胞融合 → 雜交瘤細(xì)胞的選擇培養(yǎng) → 雜交瘤細(xì)胞的的篩選
→ 雜交瘤細(xì)胞的克隆化 → 單克隆抗體的檢定 → 雜交瘤細(xì)胞系的建立 → 單克隆抗體的大量制備(動(dòng)物體內(nèi)誘生法和體外培養(yǎng)法)

4、單克隆抗體的應(yīng)用
(1)診斷試劑:用于各種病原體以及腫瘤的診斷。
(2)治療試劑:獸醫(yī)臨床上傳染病的治療;醫(yī)學(xué)臨床上抑制器官移植排斥、治療自身免疫疾病、制備生物導(dǎo)彈。
(3)檢測試劑:各種病原體毒力因子的檢測;各種免疫細(xì)胞及其它組織細(xì)胞表面分子的檢測。